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✨ CCK8实验原理和步骤.doc 下载 ✨

发布时间:2025-03-02 15:35:55来源:

🚀 实验背景 🧪

在现代生物医学研究中,细胞活性的测定是一项基础且重要的工作。CCK-8试剂盒以其高灵敏度、便捷性和良好的重复性,在众多细胞活性检测方法中脱颖而出。它通过测量细胞内脱氢酶的活性来间接反映细胞的代谢活性,从而评估细胞的存活状态。

🔍 实验原理 🔍

当CCK-8试剂加入到含有活细胞的培养基中时,其中的脱氢酶会将CCK-8还原成具有高度水溶性的黄色物质(formazan)。这种形式的产物可以直接溶解于培养基中,无需进行复杂的洗涤步骤。通过比色法,可以测定450nm波长下的吸光值,进而计算出细胞的存活率。

📝 实验步骤 📝

1️⃣ 准备样品:将待测细胞接种到96孔板中,每个孔中加入适量的细胞悬液。

2️⃣ 加入试剂:在细胞培养24小时后,小心移除上清液,并向每个孔中加入CCK-8试剂。

3️⃣ 培养反应:将96孔板放入培养箱中继续培养约1-4小时。

4️⃣ 测定结果:使用酶标仪在450nm波长下测定吸光值,通过标准曲线计算细胞存活率。

💡 小贴士 💡

- 确保所有操作均在无菌条件下进行。

- 严格按照说明书中的推荐条件进行实验。

- 实验结束后妥善处理废弃物。

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